Был создан список cyb.list с мнемониками выбранных организмов. Из базы Swiss-Prot были получены последоввательности белков с помощью команды:
seqret @cyb_list cyb.fasta
Эти последовательности были выровнены командой:muscle -align cyb.fasta -output cyb-alignment.fasta
Для программ по построению филлогенетических деревьев формат выравниваний должен быть "phylip-relaxed", поэтому был создан скрипт по указаниям в инструкции.Для создания скобочной формулы для построения дерева использховались команды: fastme:
fastme -i cyb.phy -p p -o cyb_pdist.tree
fastme, оценивая эволюционные расстояния с помощью модели MtREV:fastme -i cyb.phy -p M -o cyb_mtrev.tree
IQ-TREE:iqtree -s cyb.phy
Скобочные формулу у fastme и MtREV получились одинаковые и филогенетичские деревья, как следствие тоже идентичны. Можно предположить, что это связанно с тем, что были взяты животные разных отрядов.Обе программы рассчитывают расстояние как долю позиций, по которым последовательности различаются, но MtREV - это модель, созданная специально для митохондриальных белков млекопитающих. Она учитывает наблюдаемые в природе частоты замен одних аминокислот на другие, а значит должна быть более точной. Но так как все таки расстояние между видами разных отрядов слишком большое, даже простая программа fastme справилась с задачей. Даже расстояния совпадают.
Из ниже приведенных филогенетичсеких деревьев похоже на дерево из практикума 1 дерево на рисунке 3, скобочная формула которого была полученна программой iqtree.